Entwicklung von zellularen Indikatorsystemen zur Identifikation von Modulatoren der HIV-1 Genexpression
b'Es wurde ein Assay-System auf Basis von Reporter-Konstrukten entwickelt, dass eine Detektion der HIV1- Tat und Rev-Funktion auf Einzelzell-Ebene erm\\xf6glichte. Dieses fluoreszenzbasierte System wurde hinsichtlich seiner Eigenschaften untersucht und charakterisiert. Es wurde gezeigt, dass es sich dazu eignet sowohl die Tat- als auch die Rev-Funktion konzentrationsabh\\xe4ngig darzustellen. Des Weiteren konnten bereits beschriebene Inhibitoren der Rev-Funktion durch den Assay best\\xe4tigt werden, was die Zuverl\\xe4ssigkeit des Testsystems belegt. Au\\xdferdem erm\\xf6glichte dieses System in durchgef\\xfchrten Versuchen eine Quantifizierung der RNA-destabilisierenden Aktivit\\xe4t von INS-Elementen des HIV-Genoms.\\nDurch die Herstellung einer stabilen Zelllinie mit einem entwickelten Reporter-Konstrukt und die Etablierung einer Fluoreszenzmikroskopie- und FACS-basierten Auswertung der Daten wurde die Grundlage f\\xfcr eine umfangreiche Suche nach Inhibitoren der HIV-1 Genexpression gelegt.\\nIm Laufe erster \\u201eScreenings\\u201c nach zellul\\xe4ren Inhibitoren der HIV-Genregulation wurden in einer cDNA-Bank aus f\\xf6talem Hirn mehrere inhibitorisch wirksame Kandidaten-cDNAs identifiziert. Damit konnte gezeigt werden, dass zellul\\xe4re Faktoren potentiell dazu in der Lage sind regulierend bzw. inhibierend in die HIV-1 Genexpression einzugreifen.'